酶工程试题A卷及答案.doc

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酶工程试题A卷及答案.doc
一 名词解释（每题3分，共计30分）
1.酶工程
2.自杀性底物
3.别构酶
4.诱导酶
5.Mol催化活性
6.离子交换层析
7.固定化酶
8.修饰酶
9.非水酶学
10.模拟酶
二 填空题(每空1分,共计30分)
1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是_________________________，二是________________________。
2.求Km最常用的方法是_________________________  。
3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是_________________，另一类是__________________。
4.可逆抑制作用可分为_________________，_________________，_________________，_________________。
5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是______，二是能够利用廉价原料，发酵周期______，产酶量______，三是菌种不易______，四是最好选用能产生______酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
6.酶活力的测定方法可用________反应法和________反应法。
7.酶制剂有四种类型即________酶制剂，____________酶制剂，____________酶制剂和____________酶制剂。
8.通常酶的固定化方法有_______法，_____________________法，_________________法，____________法。
9.酶分子的体外改造包括酶的________修饰和_________________修饰。
10.模拟酶的两种类型是_________________酶和__________酶 。
11.抗体酶的制备方法有__________法和________________法。
三 问答题(每题10分,共计40分)
1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？
2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。
3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？
4.下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。
[S](mol/L)V0(umol/min)
0.5?10-628
4.0?10-640
1.0?10-570
2.0?10-595
4.0?10-5112
1.0?10-4128
2.0?10-4139
1.0?10-2140
酶工程技术试题答案及评分细则
一
1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。
3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶
4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶
5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目
6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。
7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶
8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶
9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学
11.模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
二
1.酶分子结构   反应条件
2.双倒数作图法
3.序列机制 乒乓机制
5.竞争性 反竞争性 非竞争性 混合性
6.致病菌 短 高 退化 胞外
7.终止反应法 连续反应法
8.液体酶制剂 固体酶制剂 纯酶制剂 固定化酶制剂
9.吸附法 共价键结合法 交联法 包埋法
10.半合成酶 全合成酶
11.拷贝法 引入法
三
1优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺
（2）可以在较长的时间内连续使用
（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化
（4）提高了酶的稳定性
（5）较能适于多酶反应
（6）酶的使用效率高 产率高 成本低
缺点
（1）固定化时酶的活力有损失
（2）比较适应于水溶性底物
（3）与完整的细胞相比，不适于多酶反应。（每点一分，答满满分）
2.方法
透析与超虑  离心分离  凝胶过滤  盐析  等电点沉淀 共沉淀  吸附层析  电泳 亲和层析 热变性 酸碱变性 表面变性等（写出一种方法1分）
每种方法的原理叙述总计7分
3.（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样
（2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶
（3）来源广泛，价格便宜
（4）微生物易得，生长周期短
（5）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高
（6）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种
每点2分，满分10分
4.最大反应速度140
Km: 1.0?10-5
每项5分，但要作出合理的说明或计算。

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