酶工程试题B卷答案及评分标准

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酶工程试题B卷答案及评分标准
一 名词解释
1.抗体酶
2.酶反应器
3.模拟酶
4.产物抑制
5.稳定pH
6.产酶动力学
7.凝胶过滤
8.固定化酶
9.非水酶学
10.液体发酵法
二 填空题(每空1分,共计30分)
1.Km值增加，其抑制剂属于________抑制剂，Km不变，其抑制剂属于______抑制剂，Km减小，其抑制剂属于________抑制剂。
2.菌种培养一般采用的方法有________ 培养法和________ 培养法。
3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括______，________ ，________ ，________，_______.和____________等。
4.打破酶合成调节机制限制的方有______________，________，_________________。
5.酶生物合成的模式分是_______，___________，_________________，______________ 。
6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有____________法，________法和___________法
7. 通常酶的固定化方法有________法，_____________法，_____________法，______法。
8. 酶分子的体外改造包括酶的________修饰和_________________修饰。
9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的________ ，从而降低了底物分子的________ ，而抗体结合的抗原只是一个________ 态分子，所以没有催化能力
三 问答题(每题10分,共计40分)
1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？
2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？
3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团
4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化倍数。
体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml）
初提取液1202002.5
硫酸铵沉淀58101.5
（1）起始总活力：200?120＝24000（单位）   1分
（2）起始比活力：200?2.5＝80（单位/毫克蛋白氮）   1分
（3）纯化后总活力810?5＝4050（单位）2
（4）纯化后比活力810?1.5＝540（单位/毫克蛋白氮）  2分
（5）产率（百分产量）：4050?24000＝17％   2分
（6）纯化倍数：540?80=6.75
酶工程试题B卷答案及评分标准
一
1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶
2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。
3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。
5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH
6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。
7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。
8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶
9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学
10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。
二
1.竞争性 非竞争性 反竞争性
2.固体  液体
3.温度 pH 通风量（或氧气） 搅拌 泡沫 湿度。
4.控制条件 遗传控制 其它方法
5.同步合成型 延续合成型 中期合成型 滞后合成型
6.热变性法 酸碱变性法 表面变性法
7.吸附法 共价键结合法 交联法 包埋法
8.表面修饰 内部修饰
9.过渡态 能障  基
三
1.一般必须符合下列条件
（1）不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关
（2）能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高
（3）菌种不易变异退化，不易感染噬菌体
（4）最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高
（5）在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要。
每点2分
2.（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性
（2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等
每项5分
3.（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基2分
（2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基2分
（3）半胱氨酸的巯基1分
（7）丝氨酸 骆氨酸 苏氨酸上的羟基2分
（8）苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环1分
（9）组氨酸上的咪唑基1分
色氨酸上的吲哚基1分
4.（1）起始总活力：200?120＝24000（单位）   1分
（2）起始比活力：200?2.5＝80（单位/毫克蛋白氮）   1分
（3）纯化后总活力810?5＝4050（单位）2
（4）纯化后比活力810?1.5＝540（单位/毫克蛋白氮）  2分
（5）产率（百分产量）：4050?24000＝17％   2分
（6）纯化倍数：540?80=6.75   2分

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